Фазно-контрастни микроскоп
 | |
| Употреба | Посматрање ћелијске структуре без потребе за убијањем ћелија употребом контраста |
|---|---|
| Сродни делови | Оптички микроскоп |
Фазно-контрастни микроскоп припада оптичким микроскопима и примарно се користи за једноставну микроскопију хистолошких лопатица дебљине 5-20 микрона, које се режу микротомом. Пошто се ћелија састоји од 70% воде, ћелијске органеле и структуре су транспарентне и слабо апсорбују светлост. Да би се повећао контраст, користи се фазно-контрастни микроскоп. Његова предност лежи у чињеници да ћелијске структуре не морају бити обојене.
Структуре се разликују само по оптичкој густини и индексу преламања у ћелији. Фазно-контрастни микроскоп повећава фазни помак таласних дужина светлосних снопа који путују кроз различите ћелијске структуре, што омогућава бољи контраст и могућност диференцијације структура. Наше око не детектује фазне помаке светлосних таласа, већ детектује промене у амплитудама таласа. Ове амплитуде се значајно мењају са додатком фазних помака, који се опажа као контраст у контрасту. Са овим микроскопом видећемо оптички гушће структуре тамније од других.
За откриће овог микроскопа, почетком 1930их година[1], који омогућава истраживање ћелијске структуре без потребе за убијањем ћелија употребом контраста, холандски физичар Фриц Зернике добио је Нобелову награду за физику 1953. године.[2]
Принцип рада
У оптичкој оси микроскопа постоје директни и дифрактивни зраци. Директни зраци су зраци које пролазе кроз водени медијум, а дифузори су они који продиру у оптички густ медијум (то могу бити органеле и структуре). Продужећи зраци у светлосном микроскопу заостају за λ/4. Међутим, желимо још већи помак фазе, који би омогућио већу амплитуду светлосних таласа, што би нам омогућило бољи контраст. У ту сврху, фазно-контрастни микроскоп има два додатна дела:
- Кондензатор округлог осцилатора
- Фазни цреп (стаклена плочица смештена између сочива и окулара и има прстенасти утор)
Кружни отвор кондензатора оставља само светлост која осветљава препарат. Фазна плоча дозвољава директним гредама да путују преко прореза за фазну плочу, а дисконтинуирани зраци који падају директно иза λ/4 падају на дебљи део фазе плоче, што додатно појачава кашњење снопа за λ/4. Укупни померај фазе је, дакле, λ/2, где се амплитуда таласа сабира са интерференцијом у жаришној равни окулара, и видимо да су оптички гушћи преграде ћелије тамније од осталих.
Види још
Референце
- ^ Зернике, Ф. (1955). „How I Discovered Phase Contrast”. Science. 121 (3141): 345—349. Bibcode:1955Sci...121..345Z. PMID 13237991. doi:10.1126/science.121.3141.345. (језик: енглески)
- ^ „The Nobel Prize in Physics 1953, Nobel Media AB”. www.nobelprize.org. Приступљено 26. 12. 2018. (језик: енглески)
Спољашње везе
- Optical Microscopy Primer — Phase Contrast Microscopy by Florida State University (језик: енглески)
- Phase contrast and dark field microscopes by Université Paris Sud (језик: енглески), (језик: француски)
