分光光度法
檯式的分光光度计
贝克曼(Beckman) IR-1 分光光度计, 1941年
贝克曼DB型号分光光度计 (一个双光束型号), 1960年
用于图形行业的手持式分光光度计[1] 。
在化学中,分光光度法 (英語:Spectrophotometry )是材料的反射或透射特性随波长变化的定量测量[2] 。它比一般的电磁光谱法 更具体,因为分光光度法处理可见光 ,近紫外光 和近红外光 ,但不包括时间分辨光谱 技术。
概论
分光光度法是一种工具,取决于对有色化合物吸收多少光,对分子进行定量分析。 分光光度法使用称为分光光度计的光度计 ,该光度计 可以测量光束强度作为其颜色(波长)的函数。分光光度计的重要特征是光谱带宽(它可以透射通过测试样品的颜色范围),样品透射率的百分比,样品吸收率的对数范围,有时还包括反射率测量的百分比。
分光光度法通常用于测量溶液,透明或不透明固体(例如抛光玻璃)或气体的透射率或反射率。
分光光度法的使用涉及多个科学领域,例如物理学 ,材料科学 ,化学 ,生物化学 ,化学工程 ,和分子生物学 [3] 。 它们被广泛用于许多行业,包括半导体,激光和光学制造,印刷和法医检查以及化学物质研究实验室。 分光光度法通常用于酶活性的测定,蛋白质浓度的测定,酶动力学常数的测定以及配体结合反应的测定。最终,分光光度法能够根据对照或校准物来确定什么 通过计算观察到的波长,目标中存在的物质以及确切的数量。
将含有各种波长的混合光分散为各种单色光 ,使每种单色光依次通过某一浓度溶液,测定溶液对每种光波的吸光度,绘出吸收光谱。由于物质的吸收光区域和强度与结构密切相关,根据特有的吸收光谱可作分子结构分析。此外,利用特定波长的单色光分别透过标准溶液与待测溶液,比较其吸光度,可作定量分析 。
分光技術中包括了分光光度計(英語:spectrophotometer )是一種分析光 的強度 的物理 實驗室設備 ,可以量測不同波長 光 的強度 ,分析波長 與光 強度 的關係。亦可以量測特定物質的吸光度 或透光度。目前有許多種分光儀,如指針型、數字型。
紫外-可见分光光度法
紫外-可见分光光度法 (Ultraviolet–visible spectroscopy,缩写:UV-Vis),又称“紫外-可见分子吸收光谱法”,是以紫外线 -可见光 区域电磁波 连续光谱作为光源照射样品,研究物质分子 对光吸收的相对强度的方法。通过分子紫外-可见分子吸收光谱法的分析可以进行定性分析 ,并可依据朗伯-比尔定律 进行定量分析 。
參见
参考资料
测量仪器 技术 取样 校准
化学计量学
校准曲线
基质效应
内标法
标准加入法
同位素稀释
主要出版物
化验员
分析化学学报
分离与生物分析化学
分析化学
分析生物化学
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